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Nicomp380 Z3000 激光粒度仪 在牛血清白蛋白Zeta电位的使用事例

发布时间:2023-12-15 来源:激光粒度仪

  20多年来,重组DNA技能使蛋白质成为逐步重要的质料药。蛋白质与其他小分子有机质料不同,它们的物理性质和化学性质不稳定,易于发生显着的改变。蛋白质药物的出产、运送、存储以及施用过程中的任何环节都可能会导致蛋白的变性。蛋白质物理性质的不稳定(如集合或沉积)会影响药物的剂量、药效以及药物的安全性。

  图1为牛血清白蛋白(BSA,西格玛奥德里奇公司)用去离子水按1:100份额稀释的体积粒度NiComp散布,粒度呈双峰散布,主峰为~5nm,次峰~25nm。粒度散布图显现此样品很“洁净”,仅有0.5%体积的颗粒集合体。稀释后的牛血清白蛋白溶液用0.01MHCl和0.01M KOH滴定,在不同的pH值别离丈量溶液的Zeta电位,测验成果如图2所示,等电点为pH5.07。

  选用美国PSS激光粒度仪Nicomp380Z3000检测蛋白质的粒度散布和Zeta电位来判别该蛋白的稳定性。依据Zeta电位能确认等电点(IEP)。等电点是颗粒、胶体或分子在剪切面的净电荷为零时的pH值,在此pH值下,胶体颗粒在电场中坚持静止不动。要想测定等电点,首要对颗粒涣散系统进行一系列pH值滴定,然后别离丈量不同pH值下的Zeta电位,Zeta电位为零时的pH值即为等电点。在此pH值邻近颗粒不再具有静电稳定性由此发生凝集。

  NiComp380 Z3000不仅能检测剖析亚微米蛋白质及其集合体,并且还可以终究靠Zeta电位的丈量猜测蛋白质涣散系统的稳定性。

  动态光散射(DLS)和电泳光散射(ELS)技能能用于监测蛋白质颗粒粒度散布和Zeta电位。蛋白质颗粒的粒度散布较宽,从亚微米的可溶微粒到较大的不溶性沉积大颗粒。此外,还可以精确的经过Zeta电位和等电点猜测蛋白质的空间位阻稳定性。